--

14 (1) 2019

Đánh giá tác động của Polybrene lên quá trình chuyển gen GFP vào tế bào gốc trung mô từ mô mỡ chuột


Tác giả - Nơi làm việc:
Phạm Lê Bửu Trúc - Trung tâm Công nghệ Sinh học Thành phố Hồ Chí Minh, Viện Tế bào gốc, Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG TP. HCM , Việt Nam
Vũ Bích Ngọc - Viện Tế bào gốc, Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG TP. HCM , Việt Nam
Nguyễn Ngọc Cường - Viện Tế bào gốc, Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG TP. HCM, Công ty TNHH Công nghệ sinh học Dược NANOGEN , Việt Nam
Bùi Thị Vân Anh - Viện Tế bào gốc, Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG TP. HCM , Việt Nam
Tác giả liên hệ, Email: Bùi Thị Vân Anh - buutruc@gmail.com

Tóm tắt
Tế bào gốc trung mô từ mô mỡ (Adipose Tissue-Derived Stem Cells-ADSCs) có những ưu điểm như khả năng tự làm mới, biệt hóa thành nhiều loại tế bào, dễ dàng thu nhận, ít gây xâm lấn, số lượng tế bào dồi dào và đặc biệt là có thể sử dụng làm nguồn tự ghép. Để thực hiện các nghiên cứu nhằm ứng dụng ADSCs cho y học tái tạo và công nghệ mô, việc chuyển gen gfp vào tế bào này nhằm theo dõi sự di cư, biệt hóa và các tác động của tế bào ghép trong cơ thể nhận là một việc cần thiết. Trong nghiên cứu này, ADSCs chuột (mADSCs) được chuyển gen gfp trong điều kiện có (lô polybrene) và không có polybrene (lô non-polybrene). Tác động của polybrene lên quá trình chuyển gen được đánh giá thông qua khả năng phát sáng của tế bào được chuyển gen, phần trăm số tế bào phát sáng và thời gian nhân đôi của tế bào sau chuyển gen. Kết quả cho thấy gen gfp đã được chuyển vào mADSCs ở cả 2 lô: lô polybrene và lô non-polybrene. Tuy nhiên, hiệu quả chuyển gen ở lô non–polybrene cao hơn lô polybrene (86,2% > 71,13%). Thời gian nhân đôi của mADSC-gfp ở lô non-polybrene tương đương với thời gian nhân đôi của mADSC bình thường (32,5 giờ ~ 32,64 giờ); trong khi thời gian nhân đôi này ở mADSC-gfp lô polybrene dài hơn lô non-polybrene và lô đối chứng (40,98 giờ > 32,5 giờ ~ 32,64 giờ).

Từ khóa
ADSC; chuyển gen; GfP; Polybrene; tế bào gốc trung mô

Toàn văn:
PDF

Tài liệu tham khảo

Anderson, P., Carrillo-Gálvez, A. B., García-Pérez, A., Cobo, M., & Martín, F. (2013). CD105 (endoglin)-Negative murine mesenchymal stromal cells define a new multipotent subpopulation with distinct differentiation and immunomodulatory capacities. PLoS ONE, 8(10), Article e76979.


Aslan, H., Zilberman, Y., Kandel, L., Liebergall, M., Oskouian, R. J., Gazit, D., & Gazit, Z. (2006). Osteogenic differentiation of noncultured immunoisolated bone marrow-derived CD105+ cells. Stem Cells, 24(7), 1728-1737.


Chang, C. B., Han, S. A., Kim, E. M., Lee, S., Seong, S. C., & Lee, M. C. (2013). Chondrogenic potentials of human synovium-derived cells sorted by specific surface markers. Osteoarthritis Cartilage, 21(1), 190-199.


Dominici, M., Blanc, K. L., Mueller, I., Slaper-Cortenbach, I., Marini, F. C., Krause, D. S., … Horwitz, E. M. (2006). Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The international society for cellular therapy position statement. Cytotherapy, 8(4), 315-317.


Gimble, J. M., Katz, A. J., & Bunnell, B. A. (2007). Adipose-derived stem cells for regenerative medicine. Circulation Research, 100(9), 1249-1260.


Lin, C. S., Lin, G., & Lue, T. F. (2012). Allogeneic and xenogeneic transplantation of adipose-derived stem cells in immunocompetent recipients without immunosuppressants. Stem Cells and Development, 21(15), 2770-2778.


Lin, P., Correa, D., Lin, Y., & Caplan, A. I. (2011). Polybrene inhibits human mesenchymal stem cell proliferation during lentiviral transduction. PLoS One, 6(8), Article e23891.


Miana, V., & Gonzalez, E. (2018). Adipose tissue stem cells in regenerative medicine. Ecancermedicalscience, 12, 822-836.


Mizuno, H., & Hyakusoku, H. (2014). Fat grafting supplemented by adipose-derived stem cells for breast augmentation. In M. A. Shiffman, Di Giuseppe, & F. Bassetto (Eds.), Stem cells in aesthetic procedures: Art, science, and clinical techniques (pp. 557-562). Berlin, Germany: Springer.


Pepinsky, B., Hession, C., Chen, L. L., Moy, P., Burkly, L., Jakubowski, A., … Luhowskyj, S. (1992). Structure/function studies on vascular cell adhesion molecule-1. Journal of Biological Chemistry, 267(25), 17820-17826.


Prasher, D. C., Eckenrode, V. K., Ward, W. W., Prendergast, F. G., & Cormier, M. J. (1992). Primary structure of the Aequorea victoria green - Fluorescent protein. Gene, 111, 229-233.


Ricks, D. M., Kutner, R., Zhang, X. -Y, Welsh, D. A., & Reiser, J. (2008). Optimized lentiviral transduction of mouse bone marrow-derived mesenchymal stem cells. Stem Cells and Development, 17(3), 441-450.


Strem, B. M., Hicok, K. C, Zhu, M., Wulur, I., Alfonso, Z., Schreiber, R. E., … Hedrick, M. H. (2005). Multipotential differentiation of adipose tissue-derived stem cells. The Keio Journal of Medicine, 54(3), 132-141.


Wagner, W., Wein, F., Seckinger, A., Frankhauser, M., Wirkner, U., Krause, U., … Ho, A. D. (2005). Comparative characteristics of mesenchymal stem cells from human bone marrow, adipose tissue, and umbilical cord blood. Experimental Hematology, 33(11), 1402-1416.


Yang, J., Wang, N., Chen, D., Yu, J., Pan, Q., Wang, D., … Li, L. (2017). The impact of GFP reporter gene transduction and expression on metabolomics of placental mesenchymal stem cells determined by UHPLC-Q/TOF-MS. Stem Cells International, Article 3167985, 1-12.


Yoshimura, K., Shigeura, T., Matsumoto, D., Sato, T., Takaki, Y., Aiba-Kojima, E., … Gonda, K. (2006). Characterization of freshly isolated and cultured cells derived from the fatty and fluid portions of liposuction aspirates. Journal of Cellular Physiology, 208(1), 64-76.


Yu, G., Wu, X., Kilroy, G., Halvorsen, C. Y.-D., Gimble, J. M., & Floyd, Z. E. (2011). Isolation of murine adipose-derived stem cells. Methods Molecular Biology, 702, 29-36.


Yu, J., Xu, X., Zhu, C., Pan, Q., Yang, J., Ma, J., … Li, L. (2015). GFP labeling and hepatic differentiation potential of human placenta-derived mesenchymal stem cells. Cellular Physiology and Biochemistry, 35(6), 2299-2308.


Zimmerlin, L., Donnenberg, V. S., Pfeifer, M. E., Meyer, E. M., Péault, B., Rubin, J. P., & Donnenberg, A. D. (2010). Stromal vascular progenitors in adult human adipose tissue. Cytometry A, 77(1), 22-30.


Zuk, P. A., Zhu, M., Ashjian, P., De Ugarte, D. A., Huang, J. I., Mizuno, H., … Hedrick, M. H. (2002). Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell, 13(12), 4279-4295.



DOI: https://doi.org/10.46223/HCMCOUJS.tech.vi.14.1.433.2019
Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.